离子色谱仪可以检测糖是因为什么原理
2020-05-25 11:40:54
离子色谱仪可以检测糖是因为什么原理
常见糖类物质在水中的pKa值见表1,可见常见单、双糖和糖醇的pKa一般在l2~14之间,而常见糖醛酸和糖胺的pKa也都小于7。当所处碱性溶液的pH值≥l2时,大多数糖类化台物均能部分或全部以阴离子的形式存在,因而可以采用阴离子交换色谱柱,以强碱性溶液为淋洗液进行分离。由于糖分子结构中还存在疏水部分,因而糖的分离机理除阴离子交换之外,还有疏水性吸附作用。糖类化合物在阴离子交换分离柱上的保留能力主要取决于糖类化合物所带的电荷数、分子大小、组成和结构[1]。
安培检测是通过测量电化学活性物质在适当的施加电位下发生氧化或还原反应时所产生的电流变化从而测定该物质的一种检测技术。糖的分离是在碱性条件下完成,而金电极的检测条件通常为碱性,且金电极表面还可为糖的电化学氧化反应提供反应环境,因而金电极检测和阴离子交换分离相互间具有良好的匹配性。由于糖的氧化反应产物会覆盖在电极表面而产生不可逆的污染,因而需选择不同的施加电位对电极表面进行清洗与活化,使电极能够连续工作,即为脉冲安培检测。对糖类化合物的测定,早期多使用三电位波形。但长期试验发现在该电位波形下,电极表面容易腐蚀,且长期重现性较差[1]。Rocklin等[2]于1998年提出了新的四电位波形,大大提高了电极的使用寿命和长期稳定性,使得糖检测技术向前又迈进一大步。
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