高效液相色谱仪和二维液相色谱仪血药浓度检测的差异性

HPLC血药浓度测定

一：HPLC测定利培酮及其代谢物血药浓度过程

采集10个一周内服用稳定剂量的利培酮患者血液样本，采血管（添加有抗凝剂）取利培酮待测血液样本2 mL，使用电子天枰称取硫酸铵2 g，10份，再配制30 mL的利培酮提取剂，提取剂为体积比为4：1的乙酸乙酯和二氯甲烷。将2 g的硫酸铵加入到采血管中，混匀至硫酸铵溶解，再用移液枪准确移取3 mL药物提取剂，于采血管中振摇5分钟，让其充分混匀，达到提取剂萃取药物的目的，混合均匀后置于离心机中2000 r/min离心10 min；配制缓冲盐溶液1000 mL：取320 mL的乙腈和680 mL的缓冲盐溶液置于1000 mL的容量瓶中，即得流动相；离心完毕后，取出采血管，置于超净工作台试管架，分别吸取上清夜于敞口玻璃试管中，置于氮气流下氮吹10 min，吹干后加入流动相（乙腈：0.03mol/L的醋酸铵=32：68）400 uL，使试管中样品溶解，溶解后转移至过滤管中，置于离心机2000 r/min离心10 min，将过滤液置于样品瓶中即得HPLC待测样品。

二：HPLC测定血液药物浓度所存在的问题

1.在血液样本萃取过程中，根据不同药物的极性和理化性质，会选用不同仲类的药物提取剂，因此导致了HPLC测定血液药物浓度所使用到的试剂种类繁多；

2.普通高效液相色谱仪多使用单泵体系，由于在液相色谱分离过程中需要使用特定比例的流动相，因此流动相需要提前配制，增加了工作强度；

3.药物提取剂为具有一定极性的有机相，其对含有复杂成分的血液萃取作用不具有特异性，即药物提取剂会将云此种药物成分极性和理化性质相近的血液成分一同萃取，致使HPLC分析时长较长；

4.样品前处理过程繁多复杂增加了样品污染和患者样本混淆的概率并极大的降低了工作效率；

血药浓度监测仪（Two-dimensional liquid chromatography）血药浓度测定

一：Two-dimensional liquid chromatography样品前处理过程

方法1.采集患者血液样本，真空采血管取2 mL血浆,加入去蛋白剂3 mL，离心机4000 r/min 离心30 min，取上清液置于样品中，即得待测样品。

方法2.采集患者血液样本，先离心机4000 r/min 离心20 min，取上层血清1 mL于5 ml真空采血管中，加去蛋白剂1.5 mL，涡旋30s，离心机4000 r/min 再次离心30 min即得待测样品。

二：HPLC与Two-dimensional liquid chromatography性能对比

1.样品前处理:普通的高效液相色谱仪需要对血液样本经过一系列的处理工作，整体下，HPLC前处理时间在1-2小时，极大的影响了样本检测效率；而血药浓度监测仪（Two-dimensional liquid chromatography）整体的样本处理到可以上样检测时长一般为0.5-1小时，缩短了一般及以上的时间。

2.样本分析时间：HPLC的分析时长根据药物的不同而存在差异，一般在20-30 min；而血药浓度检测仪的分析时长则普遍在10 min以内，单个样本的分析时间较高效液相色谱仪缩短了一倍，极大的提高了检测效率。

在高效液相色谱仪和二维液相色谱仪血药浓度检测应用方面，后者已经成为目前国内主要的血药浓度检测仪器。其所具备的在线固相萃取技术为临床血药浓度检测极大的缩短了检测时间和人工操作过程，故而提升了效率和样品被污染的概率。血药浓度监测仪具备全天候的自动样品检测功能，在系统方法设置完毕后，能实现在无人员值守的情况下运行。

随着国家在医药领域的管控力度的加大，血药浓度检测的应用前景必将更加广阔，尤其在精神科、肿瘤科、感染科等率先展开血药浓度检测试点工作，为医生提供更加精确的用药指导，减少滥用药，不合理用药的出现，及时调整药物用量或药物种类，从而提高药物治疗的功效、减少患者的疾病复发率，控制病情。

   通用（深圳）仪器有限公司是专业生产液相色谱仪和离子色谱仪的厂家，主要产品有：全自动二维液相色谱仪（血药浓度检测），欧盟RoHS2.0检测仪、全自动二维离子色谱仪（血药浓度--碳酸锂专用），专用离子色谱仪--糖专用测试仪，通用离子色谱仪，在线离子色谱仪-电厂水质监测，液相色谱互动教学系统，通用液相色谱仪等.

作者：通用（深圳）仪器  实验分析员 欧云  （转载请注明出处，侵权必究）